助力體外ADMET實驗—動物肝細胞
藥物的肝臟代謝
肝臟承擔著體內物質的代謝、血漿蛋白的合成、儲存維生素和糖原、解毒和胚胎發育階段的造血功能、免疫防御應答等功能。肝臟細胞由肝實質細胞（Hepatocytes or hepatic parenchymal cells）和非實質細胞（Non Parenchymal Cells）組成，其中非實質細胞由肝星狀細胞（Hepatic Stellate Cells）、枯否細胞（Kupffer Cells）、肝竇內皮細胞（Sinusoidal endothelial cells）等細胞組成。肝實質細胞是構成肝臟的主要細胞，約占肝內細胞總數的65%，肝實質細胞總量約占肝體積的80%。
肝臟是藥物代謝和清除的主要部位, 當藥物分子經門靜脈進入肝血液循環后, 通過被動擴散或經肝細胞基底側膜的轉運蛋白將藥物轉運至肝細胞內。藥物分子在肝細胞內經Ⅰ相代謝酶介導的氧化、還原和水解, 和Ⅱ相代謝酶介導結合反應后，其最終代謝產物經肝細胞的膽管側膜轉運蛋白進入膽汁，最后排泄入腸道。同時藥物本身及其代謝產物都可能作為核受體的配體，進而激活核受體的轉錄調控活性，改變相關的藥物代謝I, II相酶和藥物轉運體的表達，從而參與藥物自身乃至其他藥物的代謝調控過程（圖1）〔1〕。
圖1：藥物分子肝代謝調控過程簡圖
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肝細胞模型及其藥物研發應用
隨著肝細胞分離技術和低溫儲藏技術的發展，人和動物肝實質細胞（Hepatocytes）在藥物開發階段被廣泛使用，例如應用于體外評估和預測藥物代謝、毒性、藥物與藥物相互作用（DDI），如圖2〔2〕所示：
圖2：肝細胞的應用
原代肝細胞基本保留和維持了體內肝細胞的功能與活性，特別是保留了與體內一致的代謝酶活性，實驗具有較好的重現性, 已成為臨床前肝臟藥物安全評估及藥代動力學等研究領域的最常用的細胞模型之一, 其中原代人肝細胞仍然被認為是評估藥物代謝和毒性的體外模型的黃金標準。
妙順生物具備有優化的肝細胞分離技術和凍存程序, 可提供多物種的高品質凍存肝細胞，助力藥物研發相關應用。所有原代肝細胞產品均通過嚴格質量鑒定和放行標準，可為研究人員提供所需的原代肝細胞批次質檢數據。
原代肝細胞經歷低溫凍存后，在體外復蘇培養中呈現2種狀態：懸浮型和貼壁型。
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懸浮肝細胞
懸浮肝細胞在藥物穩定性評價實驗、代謝物鑒定等研究實驗中被廣泛應用，體外細胞培養時間大約為4-6個小時。妙順生物提供凍存動物懸浮肝細胞，包含嚙齒類（大鼠、小鼠）、犬、食蟹猴等。
一次性混合凍存；
嚙齒類單一批次＞50管，犬和食蟹猴單一批次＞100管；
純化前的復蘇活力＞70%，復蘇過程未進行純化；
每凍存管含活細胞數≥5million；
提供CYP酶代謝活性；
僅供體外研究使用, 不可用于人或動物的診斷或治療。
圖3：食蟹猴肝細胞色素P450酶活數據展示
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貼壁肝細胞
貼壁肝細胞在代謝酶誘導實驗、肝毒性研究、小核酸藥物開發等研究領域被廣泛應用，妙順生物提供不同物種來源的貼壁肝細胞，包含嚙齒類（大鼠、小鼠）、犬、食蟹猴等。
嚙齒類單供體＞20管，犬和食蟹猴單供體＞50管；
復蘇活力＞70%，復蘇過程未進行純化；
每凍存管含活細胞數≥5million；
提供每一批次細胞貼壁培養形態圖；
提供CYP酶代謝活性；
僅供體外研究使用, 不可用于人或動物的診斷或治療。
左圖：食蟹猴肝細胞復蘇后貼壁72h
中圖：SD大鼠肝細胞復蘇后貼壁24h
右圖：C57BL/6小鼠肝細胞復蘇后貼壁24h
妙順生物
妙順（上海）生物科技有限公司（Milestone Biotechnologies ）是一家從事細胞分離、質檢、功能性評價服務、以及進口代理服務的創新型生物科技公司。TPCS是妙順生物旗下細胞分離服務品牌，為用戶提供免疫細胞分離服務、肝細胞分離服務及解決方案。原代細胞分離服務優勢：依據項目需求提供樣本解決方案、嚴格的樣本分離和質檢、提供樣本冷鏈運輸全程的溫控記錄。
電話咨詢：021-64169739-802
郵箱咨詢：sales@miles-bio.com
引用文獻：
[1]Shin H K , Kang Y M , No K T . Predicting ADME Properties of Chemicals. Springer International Publishing, 2017.
[2]Albert, P, Li. In vitro human hepatocyte-based experimental systems for the evaluation of human drug metabolism, drug-drug interactions, and drug toxicity in drug development. Current topics in medicinal chemistry, 2014.
