如何提高ADCC實驗成功率？
抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC) ，是生物機體通過抗體清除感染、癌變或衰老細胞的主要途徑，也是目前抗體藥物藥效評價的重要手段之一。ADCC廣泛應用于抗體新藥研發和改造，仿制藥開發和研發過程中抗體質量及功能的分析，同時在生物藥和免疫調節藥物的臨床試驗中，ADCC活性也是ex vivo檢測指標之一。
我們都知道，單克隆抗體是由兩條重鏈（H鏈）和兩條輕鏈（L鏈）通過共價鍵和非共價鍵聯合形成的生物大分子，每條鏈又由抗原結合部位(Fab)和恒定區(Fc)組成?？贵w藥物在體內主要有兩類的生理活性：一是通過Fab識別并專一性結合抗原物質，同靶標抗原中和或促使細胞凋亡；該生理活性的作用依賴于抗體Fab與抗原的親和力。二是抗體Fc可與 NK細胞（效應細胞）表面的FcγRIIIa(CD16)結合，介導 ADCC作用。因此，抗體Fab的修飾會影響抗體抗原的親和力，從而改變抗體的中和效應；而抗體Fc的修飾也會對抗體的ADCC效應造成影響。
上圖：ADCC效應示意圖
研究發現，NK細胞表面的FcγRIIIa(CD16)具有遺傳多態性，該多態性存在于近膜端IgG結合結構域第158位，纈氨酸(V)可被苯丙氨酸(F)取代。人IgG同FcγRIIIa-V158相比FcγRIIIa-F158與人具有更高的親和力，可更有效介導 ADCC 作用，臨床研究表明，FcγRIIIa基因多態性與腫瘤病人的預后有關。因此，FcγRIIIa-V158型NK細胞FcγRIIIa-F158型NK細胞更加有利于ADCC實驗的開展，而FcγRIIIa-V158相比FcγRIIIa-F158基因頻率較低，TPCS提供供體FcγRIIIa基因分型測試與篩選服務，研究者可選擇FcγRIIIA-158V/V分型的PBMC或NK細胞分離服務以便或的良好的ADCC實驗效果。
上圖：TPCS供體FcγRIIIa基因分型測試與篩選服務部分數據
*Lot No僅供參考，聯系我們獲取最新數據信息
ADCC實驗過程包括三個重要組成部分：抗體（單抗藥物）、效應細胞（PBMC細胞或NK細胞）和靶細胞。靶細胞種類、效應細胞的選擇與檢測靶細胞活性是保證實驗成功的關鍵。效應細胞的選擇一般使用外周血單核細胞(PBMC)或自然殺傷細胞（NK細胞）。相比PBMC細胞作為效應細胞，NK細胞中抑制性免疫細胞比例更低，選擇NK細胞通?？墒笰DCC效應作用更強。為了獲得良好的實驗數據，您可選擇TPCS品牌PBMC分離服務進一步分離NK細胞或直接選擇NK細胞分離服務。
受供體免疫狀態影響，不同供體NK細胞比例差異較大，直接影響NK自PBMC的分離得率。為了降低不同供體免疫狀態的影響，TPCS提供供體預篩服務-利用流式細胞術檢測供體體內CD56+細胞比例，研究者可根據NK細胞比例需求挑選合適的供體進行PBMC分離服務。同時，TPCS提供除CD56+外多種免疫標志物預篩服務。
上圖：142例TPCS新鮮PBMC分離服務中NK細胞比例
上圖：206例TPCS凍存PBMC分離服務中NK細胞比例
上圖：TPCS品牌ADCC預篩服務部分數據展示
面對近期嚴峻疫情形勢，妙順生物迅速吹響抗疫“集結號”，為了確保廣大科研工作者項目順利進行，TPCS持續為細胞治療研發、抗體藥物研發的科學家們提供免疫細胞分離服務，涵蓋Leukopak、PBMC、T細胞、NK細胞、單核細胞等細胞分離服務，歡迎來電咨詢。聯系方式：021-64169739。
妙順（上海）生物科技有限公司（Milestone Biotechnologies ）作為民族品牌細胞服務商，開展進口替代工作，解決我國生物醫藥產業的“卡脖子”環節，致力于成為細胞與基因治療領域內一站式服務提供商。TPCS是妙順生物旗下細胞分離服務品牌，為用戶提供免疫細胞分離服務、肝細胞分離服務及解決方案。原代細胞分離服務優勢：依據項目需求提供樣本解決方案、嚴格的樣本分離和質檢、提供樣本冷鏈運輸全程的溫控記錄。
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