優選hPBMC分離服務 | 輻照后細胞增殖及崩解實驗驗證

1985年Rosenberg教授在利用IL-2 治愈第一個病人后，他迅速意識到IL-2激活了一類免疫細胞。那么第一步就是在“案發現場”尋找武器，自然而然地開始在“腫瘤浸潤細胞”中開始了實驗。從1986年動物實驗證明TIL有效，到1988年發表的第一個TIL臨床試驗結果，20個入組的melanoma病人中，11個有objective regression! 可以說腫瘤細胞治療的偉大時代在那一刻開啟了。

TIL（Tumor Infiltrating Lymphocytes，腫瘤浸潤淋巴細胞）是一種從腫瘤組織中分離出的浸潤淋巴細胞。這些淋巴細胞中有部分是針對腫瘤特異性突變抗原的T細胞，是深入到敵軍內部打擊能力最強的免疫細胞，被認為是一種機體對腫瘤細胞特異性免疫反應。

TIL療法經過40年的沉淀積累，今年8月Iovance Biotherapeutics宣布向FDA遞交了TIL療法lifileucel的滾動上市申請；10月，Lyell Immunopharma宣布FDA已批準其TIL療法LYL845的IND申請。TIL細胞藥物的未來展現了更多可能性。

腫瘤中TIL的擴增通常分兩個步驟進行，此過程的細節在不同的實驗室之間有所不同，但是總體概念保持不變。

第一步，將腫瘤的小片段置于含有一種或多種刺激T細胞的生長因子的培養基中，最常見的方法是使用白介素2（IL-2）。第一步的長度是靈活的，以允許生成足夠的細胞以啟動該過程的第二步。

第二步是所謂的快速擴增方案（REP），其中第一步中收獲的TIL在過量飼養細胞和T細胞刺激性生長因子的存在下通過觸發其T細胞受體（TCR）復合物而誘導大量增殖。第二個擴增步驟通常需要2周左右的時間。REP可使用可溶的抗CD3抗體觸發TCR，將輻照的外周血單個核細胞（PBMC）用作飼養細胞，并將IL-2用作T細胞生長因子。

• 外觀標準：標簽明確，標有服務編碼及細胞基本信息；包裝應完整，無液體滲漏；

• 微生物標準：儀器培養法無菌檢測結果陰性；支原體檢測結果陰性；HBV、HCV、HIV、TP、HTLV、B19、EB病毒檢測結果陰性；

• 細胞純度標準：單個核細胞占總細胞比例≥90%；

• 細胞活率標準：雙熒光AO/PI儀器計數法檢測細胞活率≥90%；

• 細胞數目標準：雙熒光AO/PI儀器計數法檢測細胞數目≥細胞標簽規格；

• 崩解測試：復蘇培養 14天，細胞殘留率<10%；

• 流式細胞術檢測數據。